ปฏิกิริยาลูกโซ่โพลีเมอเรส เรียกย่อว่าพีซีอาร์ในภาษาอังกฤษเป็นเทคนิคอณูชีววิทยาที่ใช้ในการขยายชิ้นส่วนดีเอ็นเอจำเพาะถือได้ว่าเป็นการจำลองดีเอ็นเอแบบพิเศษภายนอกร่างกาย ซึ่งสามารถเพิ่มปริมาณดีเอ็นเอได้น้อยมากตลอดระยะเวลาพีซีอาร์กระบวนการเกิดปฏิกิริยาเป็นสารประเภทหนึ่งที่มีบทบาทสำคัญ นั่นก็คือ เอนไซม์
1. แท็คดีเอ็นเอ
ในการทดลองในยุคแรกๆของพีซีอาร์นักวิทยาศาสตร์ใช้ Escherichia coli DNA polymerase I แต่มีปัญหากับเอนไซม์นี้: จำเป็นต้องเติมเอนไซม์ใหม่ทุกครั้งที่ดำเนินการรอบ ซึ่งทำให้ขั้นตอนการดำเนินการซับซ้อนเล็กน้อยและเป็นการยากที่จะขยายขนาดโดยอัตโนมัติอย่างเต็มที่ปัญหานี้ได้รับการแก้ไขหลังจากที่นักวิทยาศาสตร์แยก Taq DNA polymerase ออกจาก Thermus Aquaticus โดยไม่ได้ตั้งใจในปี 1988 นับตั้งแต่นั้นเป็นต้นมา การขยาย DNA โดยอัตโนมัติก็กลายเป็นความจริงการค้นพบเอนไซม์ชนิดนี้ยังทำให้พีซีอาร์เทคโนโลยีเป็นเทคโนโลยีที่สะดวก ใช้งานได้จริงและเป็นสากลปัจจุบัน Taq DNA polymerase เป็นโพลีเมอเรสที่พบมากที่สุดในชุด DNA
2. พฟูดีเอ็นเอ
ตามที่กล่าวไว้ข้างต้น Taq DNase มีข้อบกพร่องใหญ่ ดังนั้นนักวิทยาศาสตร์จึงได้แก้ไข Taq DNA polymerase ในระดับหนึ่งเพื่อหลีกเลี่ยงการขยายสัญญาณที่ไม่เฉพาะเจาะจงเนื่องจากไม่ตรงกัน ส่งผลให้ผลการทดสอบไม่ถูกต้องแต่การดัดแปลง Taq DNA polymerase สามารถยับยั้งการทำงานของ DNA polymerase ที่อุณหภูมิห้องได้PfuDNA polymerase สามารถชดเชยข้อเสียข้างต้นของ Taq DNA polymerase ได้เป็นอย่างดี เพื่อให้สามารถดำเนินการปฏิกิริยา PCR ได้ตามปกติ และสามารถปรับปรุงอัตราความสำเร็จของการขยายยีนเป้าหมายได้อย่างมีประสิทธิภาพ
3. การถอดเสียงแบบย้อนกลับ
Reverse transcriptase ถูกค้นพบในปี 1970 เอนไซม์นี้ใช้ RNA เป็นเทมเพลต dNTP เป็นสารตั้งต้น เป็นไปตามหลักการของการจับคู่เบส และสังเคราะห์ DNA สายเดี่ยวที่เสริมเข้ากับเทมเพลต RNA ในทิศทาง 5′-3′Reverse transcriptase ขึ้นอยู่กับกิจกรรม DNA polymerase เป็นหลักจากเทมเพลต DNA หรือ RNA ดังนั้นจึงไม่มีกิจกรรม exonuclease 3′-5′อย่างไรก็ตาม มีกิจกรรมของ RNase H ซึ่งจำกัดความยาวการสังเคราะห์ของ Reverse transcriptase ในระดับหนึ่งเนื่องจากความเที่ยงตรงและความร้อนต่ำของ wild Reverse transcriptase นักวิทยาศาสตร์จึงทำการแก้ไขด้วย
สำหรับพีซีอาร์การทดลอง วัสดุสิ้นเปลืองหลักคือ: หลอด PCR แต่ละหลอด, หลอด PCR 4/8-strip, แผ่น PCR
ลาบิโอวัสดุสิ้นเปลือง PCRมีดังต่อไปนี้ข้อดี:
แผ่น PCR: ความเข้ากันได้ของวงจรระบายความร้อนในวงกว้างมีความคมชัดสูง ระบุหลุมได้ง่ายการสะท้อนแสงเรืองแสงได้ดี ดีการถ่ายเทความร้อน;ได้รับการรับรอง DNase, RNase, DNA, สารยับยั้ง PCR และผ่านการทดสอบว่าปราศจากสารไพโรเจน
ท่อ PCR ส่วนบุคคล: ทนต่อการระเหยได้ดีการถ่ายเทความร้อน;ความชัดเจนทางแสงที่ดีเยี่ยม; DNase, RNase, DNA, สารยับยั้ง PCR ที่ได้รับการรับรอง และผ่านการทดสอบว่าปราศจากสารไพโรเจน
ท่อ PCR 4/8 แถบ: ผนังบางเฉียบ ความคมชัดสูง การสะท้อนแสงเรืองแสงที่ดีสามารถใช้ในอุตสาหกรรมยา อุตสาหกรรมอาหารและอณูชีววิทยา วัสดุ PP บริสุทธิ์คุณภาพสูง DNase, RNase, DNA, สารยับยั้ง PCR ที่ได้รับการรับรอง และผ่านการทดสอบว่าปราศจากสารก่อไข้
เวลาโพสต์: Jun-09-2023