ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับสื่อการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ทั่วไป (I)

ความรู้เบื้องต้นเกี่ยวกับสื่อการเพาะเลี้ยงจุลินทรีย์ทั่วไป (I)

อาหารเลี้ยงเชื้อเป็นเมทริกซ์สารอาหารผสมชนิดหนึ่งที่เตรียมขึ้นจากสารต่างๆ ตามความต้องการของการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์ต่างๆ ซึ่งใช้ในการเพาะเลี้ยงหรือแยกจุลินทรีย์ต่างๆดังนั้นเมทริกซ์สารอาหารควรมีสารอาหาร (รวมถึงแหล่งคาร์บอน แหล่งไนโตรเจน พลังงาน เกลืออนินทรีย์ ปัจจัยการเจริญเติบโต) และน้ำที่จุลินทรีย์สามารถนำมาใช้ได้ขึ้นอยู่กับชนิดของจุลินทรีย์และวัตถุประสงค์ของการทดลอง มีประเภทและวิธีการเตรียมอาหารเลี้ยงเชื้อที่แตกต่างกัน

มีการแนะนำสื่อการเพาะเลี้ยงทั่วไปบางอย่างในการทดลองดังต่อไปนี้:

อาหารเลี้ยงเชื้อวุ้น:

อาหารเลี้ยงเชื้อวุ้นใช้สำหรับการขยายพันธุ์และการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียทั่วไป เพื่อตรวจนับจำนวนแบคทีเรียทั้งหมด การอนุรักษ์สายพันธุ์แบคทีเรีย และการเพาะเลี้ยงบริสุทธิ์ส่วนผสมหลัก ได้แก่ สารสกัดจากเนื้อวัว สารสกัดจากยีสต์ เปปโตน โซเดียมคลอไรด์ ผงวุ้น น้ำกลั่นเปปโตนและผงเนื้อให้แหล่งไนโตรเจน วิตามิน กรดอะมิโน และคาร์บอน โซเดียมคลอไรด์สามารถรักษาแรงดันออสโมติกให้สมดุล และวุ้นเป็นตัวจับตัวเป็นก้อนของอาหารเลี้ยงเชื้อ

วุ้นโภชนาการเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อชนิดพื้นฐานที่สุด ซึ่งมีสารอาหารส่วนใหญ่ที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของจุลินทรีย์วุ้นโภชนาการสามารถนำมาใช้ในการเพาะเชื้อแบคทีเรียตามปกติได้

วุ้นเลือด:

อาหารเลี้ยงเชื้อในเลือดเป็นอาหารเลี้ยงเชื้อเปปโตนที่สกัดจากเนื้อวัวซึ่งมีเลือดสัตว์ที่ผ่านการละลายหัวใจแล้ว (โดยทั่วไปคือเลือดกระต่ายหรือเลือดแกะ)ดังนั้นนอกเหนือจากสารอาหารต่างๆ ที่จำเป็นสำหรับการเพาะเลี้ยงแบคทีเรียแล้ว ยังสามารถให้โคเอ็นไซม์ (เช่น แฟคเตอร์ V), ฮีม (แฟคเตอร์ X) และปัจจัยการเจริญเติบโตพิเศษอื่นๆ อีกด้วยดังนั้นอาหารเลี้ยงเชื้อในเลือดจึงมักใช้ในการเพาะปลูก แยก และรักษาจุลินทรีย์ก่อโรคบางชนิดที่ต้องการสารอาหาร

นอกจากนี้ วุ้นเลือดยังใช้สำหรับการทดสอบภาวะเม็ดเลือดแดงแตกอีกด้วยในระหว่างกระบวนการเจริญเติบโต แบคทีเรียบางชนิดสามารถผลิตเฮโมไลซินเพื่อทำลายและละลายเซลล์เม็ดเลือดแดงได้เมื่อพวกมันเติบโตบนแผ่นเลือด จะสามารถสังเกตวงแหวนเม็ดเลือดแดงแตกที่โปร่งใสหรือโปร่งแสงได้รอบๆ โคโลนีการเกิดโรคของแบคทีเรียหลายชนิดมีความสัมพันธ์กับลักษณะเม็ดเลือดแดงแตกเนื่องจากเฮโมไลซินที่ผลิตโดยแบคทีเรียต่างกันจะแตกต่างกัน ความสามารถในการสลายเม็ดเลือดแดงจึงแตกต่างกัน และปรากฏการณ์ภาวะเม็ดเลือดแดงแตกบนแผ่นเลือดก็แตกต่างกันเช่นกันดังนั้นการทดสอบภาวะเม็ดเลือดแดงแตกจึงมักใช้เพื่อระบุแบคทีเรีย

สื่อ TCBS:

TCBS คือ ไธโอซัลเฟต ซิเตรต เกลือน้ำดี ซูโครส วุ้นขนาดกลางสำหรับการแยก vibrio ที่ทำให้เกิดโรคแบบเลือกสรรสารสกัดจากเปปโตนและยีสต์ถูกใช้เป็นสารอาหารพื้นฐานในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อให้แหล่งไนโตรเจน แหล่งคาร์บอน วิตามิน และปัจจัยการเจริญเติบโตอื่นๆ ที่จำเป็นสำหรับการเจริญเติบโตของแบคทีเรียความเข้มข้นของโซเดียมคลอไรด์ที่สูงขึ้นสามารถตอบสนองความต้องการของการเจริญเติบโตของวิบริโอที่เป็นฮาโลฟิลิกซูโครสเป็นแหล่งคาร์บอนที่สามารถหมักได้โซเดียมซิเตรต สภาพแวดล้อมที่เป็นด่าง pH สูงและโซเดียมไธโอซัลเฟต ยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียในลำไส้ผงน้ำดีวัวและโซเดียมไธโอซัลเฟตส่วนใหญ่ยับยั้งการเจริญเติบโตของแบคทีเรียแกรมบวกนอกจากนี้โซเดียมไธโอซัลเฟตยังให้แหล่งกำมะถันอีกด้วยหากมีเฟอร์ริกซิเตรต แบคทีเรียสามารถตรวจพบไฮโดรเจนซัลไฟด์ได้หากมีแบคทีเรียที่สร้างไฮโดรเจนซัลไฟด์ จะเกิดตะกอนสีดำบนจานตัวบ่งชี้ของสื่อ TCBS คือสีน้ำเงินโบรโมเครโซลและสีน้ำเงินไทมอลซึ่งเป็นตัวบ่งชี้กรดเบสโบรโมเครโซลบลูเป็นตัวบ่งชี้กรดเบสที่มีช่วงการเปลี่ยนแปลง pH 3.8 (สีเหลือง) ถึง 5.4 (สีน้ำเงิน-เขียว)ช่วงการเปลี่ยนสีมีสองช่วง: (1) ช่วงกรดคือ pH 1.2~2.8 เปลี่ยนจากสีเหลืองเป็นสีแดง;(2) ช่วงอัลคาไลคือ pH 8.0~9.6 เปลี่ยนจากสีเหลืองเป็นสีน้ำเงิน

TSA ชีส ถั่วเหลือง เปปโตน วุ้น มีเดียม:

องค์ประกอบของ TSA นั้นคล้ายคลึงกับองค์ประกอบของวุ้นสารอาหารในมาตรฐานแห่งชาติ มักใช้เพื่อทดสอบแบคทีเรียที่ตกตะกอนในห้องสะอาด (พื้นที่) ของอุตสาหกรรมยาเลือกจุดทดสอบในพื้นที่ที่จะทดสอบ เปิดแผ่น TSA และวางไว้ที่จุดทดสอบจะต้องเก็บตัวอย่างเมื่อสัมผัสกับอากาศเป็นเวลานานกว่า 30 นาทีในช่วงเวลาที่ต่างกัน จากนั้นจึงเพาะเลี้ยงเพื่อการนับโคโลนีระดับความสะอาดที่แตกต่างกันต้องใช้จำนวนโคโลนีที่แตกต่างกัน

มูลเลอร์ ฮินตัน วุ้น:

สื่อ MH เป็นสื่อจุลินทรีย์ที่ใช้ในการตรวจจับความต้านทานของจุลินทรีย์ต่อยาปฏิชีวนะเป็นสื่อกลางที่ไม่คัดเลือกซึ่งจุลินทรีย์ส่วนใหญ่สามารถเจริญเติบโตได้นอกจากนี้แป้งในส่วนผสมยังสามารถดูดซับสารพิษที่ปล่อยออกมาจากแบคทีเรียได้ ดังนั้นจึงไม่ส่งผลต่อผลของการใช้ยาปฏิชีวนะองค์ประกอบของสื่อ MH ค่อนข้างหลวม ซึ่งเอื้อต่อการแพร่กระจายของยาปฏิชีวนะ เพื่อให้สามารถแสดงโซนยับยั้งการเจริญเติบโตได้ชัดเจนในอุตสาหกรรมสุขภาพของจีน สื่อ MH ยังใช้สำหรับการทดสอบความไวต่อยาด้วยเมื่อทำการทดสอบความไวของยาสำหรับแบคทีเรียพิเศษบางชนิด เช่น Streptococcus pneumoniae อาจเติมเลือดแกะ 5% และ NAD ลงในอาหารเลี้ยงเชื้อเพื่อให้ตรงตามข้อกำหนดทางโภชนาการที่แตกต่างกัน

เอสเอสวุ้น:

วุ้น SS มักใช้สำหรับการแยกและเพาะเลี้ยงเชื้อ Salmonella และ Shigella แบบคัดเลือกยับยั้งแบคทีเรียแกรมบวก โคลิฟอร์มและโพรทูสส่วนใหญ่ แต่ไม่ส่งผลต่อการเจริญเติบโตของเชื้อซัลโมเนลลาโซเดียมไธโอซัลเฟตและเฟอร์ริกซิเตรตใช้ในการตรวจจับการสร้างไฮโดรเจนซัลไฟด์ ซึ่งทำให้ใจกลางอาณานิคมเป็นสีดำสีแดงที่เป็นกลางคือตัวบ่งชี้ค่า pHอาณานิคมของน้ำตาลที่ผลิตกรดจะมีสีแดง และอาณานิคมของน้ำตาลที่ไม่หมักจะไม่มีสีSalmonella เป็นอาณานิคมที่ไม่มีสีและโปร่งใสโดยมีหรือไม่มีสีดำตรงกลาง และ Shigella เป็นอาณานิคมที่ไม่มีสีและโปร่งใส